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SANHQ(生物工藝級(jí))是用Pichiapastoris表達(dá)的重組非特異性內(nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中，有效去除核酸污染。該酶在高鹽濃度下具有良好的活性，應(yīng)用在生產(chǎn)工藝流程中提高去除效率和目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。在生物制品生產(chǎn)，如AAV載體及腺病毒載體疫苗生...

大多數(shù)研究級(jí)別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的，濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化，然后溶解在配方緩沖液中。一種改進(jìn)，特別是純度方面的改進(jìn)，基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量...

AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測(cè)定AAV的含量時(shí)，通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位，其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度，衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度?；蚪M滴度一般采用qPCR、...

相比傳統(tǒng)的Benzonase核酸酶，SAN HQ高鹽核酸酶的優(yōu)勢(shì)是在400mM-600mM鹽濃度條件下具有適宜酶活性。在這個(gè)條件下，AAV病毒載體聚集更少、更加穩(wěn)定；SAN HQ的使用能夠簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝、降低酶用量及成本，不需額外脫鹽操作；AAV病毒載體得率更高...

經(jīng)過多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級(jí)MSC/P...

有研究發(fā)現(xiàn)，桿狀病毒表達(dá)載體體系BEV生產(chǎn)的rAAV發(fā)生了與293生產(chǎn)體系不同的衣殼蛋白翻譯后修飾（post-translationalmodifications,PTMs）。這一差異是否會(huì)影響載體趨向性和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。除此之外，桿狀病毒多重inf...

除了獲得載體的滴度及產(chǎn)量，生產(chǎn)慢病毒更關(guān)心的指標(biāo)主要是各種污染物的去除?？侱NA污染的去除百分比在99.1-99.84%，總蛋白污染物的去除百分比在99.85-99.9%。針對(duì)宿主細(xì)胞的DNA（HCD）及蛋白（HCP），有報(bào)道其去除百分比分別為99.8%和99...

三種AAV載體的生產(chǎn)體系（三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系、桿狀病毒表達(dá)載體體系以及包裝細(xì)胞體系） 中都會(huì)出現(xiàn)三種衣殼：完整衣殼（full capsid）、部分衣殼（partial capsid），和空衣殼（empty capsid）。其中完整衣殼包含正確的DNA序列，是人們所...

基因藥物是指將外源基因引入靶細(xì)胞，糾正或補(bǔ)償基因缺陷或異常引起的疾病的。這種策略對(duì)許多疾病的康復(fù)有很大的潛力，包括ai癥、神經(jīng)退行性疾病和心血管疾病。目前已經(jīng)進(jìn)行了2000多項(xiàng)基因藥物臨床試驗(yàn)，大多數(shù)載體已被證明是有效和安全的。目前的研究表明，大約64%的基因...

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會(huì)通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞，AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范...

ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，2021年推出對(duì)應(yīng)的M-SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測(cè)各種生物制品的中間品、半成品和成品中M-SAN HQ中鹽核酸酶的殘留含量...

M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下的優(yōu)勢(shì)，讓其成為生物生產(chǎn)工藝中去除核酸污染的更好選擇。經(jīng)過多年的市場(chǎng)宣傳，M-SAN HQ中鹽核酸酶品質(zhì)已得到多個(gè)全球TOP CDMOs認(rèn)可，納入其工藝開發(fā)篩選平臺(tái)。此外，目前全球有10+臨床項(xiàng)目涉及的病毒載體生產(chǎn)用到M...

ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt Active Nucleases，SANs）的生產(chǎn)及質(zhì)控，包括SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上，增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，如microbes...

在生物工藝流程中，需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染，而核酸酶作為外源成份，也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右，包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9，...

Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ，中鹽核酸酶)，是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。這款核酸酶...

ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)；立足北極海洋區(qū)，致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶，用于分子研究、體外診斷和藥物領(lǐng)域。以其產(chǎn)品的獨(dú)特性質(zhì)及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)積淀，Arct...

大多數(shù)研究級(jí)別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的，濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化，然后溶解在配方緩沖液中。一種改進(jìn)，特別是純度方面的改進(jìn)，基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如...

文章作者對(duì)酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究，兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml，Mg2+濃度為5mM，通過PicoGreen檢測(cè)dsDNA含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對(duì)dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml...

ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt Active Nucleases，SANs）的生產(chǎn)及質(zhì)控，在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上，增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，如microbes、endotoxin、蛋白酶等，符合USP-EP要求。廠...

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會(huì)通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞，AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此，各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求。美國(guó)食...

在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動(dòng)物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 1...

宿主細(xì)胞DNA殘留的擔(dān)憂是基于致ai風(fēng)險(xiǎn)理論，特別是生產(chǎn)細(xì)胞系所包含的致ai序列，比如較常見腺病毒基因E1A和E1B（HEK293, PerC.6 和CAP 細(xì)胞系），人乳tou瘤病毒E6和E7基因（HeLa細(xì)胞系)等。當(dāng)使用致ai細(xì)胞系生產(chǎn)AAV時(shí)，下游純化...

大多數(shù)研究級(jí)別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的，濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化，然后溶解在配方緩沖液中。一種改進(jìn)，特別是純度方面的改進(jìn)，基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如...

此外，文章作者對(duì)每個(gè)步驟的樣品進(jìn)行納米顆粒分析（NTA），結(jié)果發(fā)現(xiàn)：澄清環(huán)節(jié)后，M-SAN HQ中鹽核酸酶和Benzonase處理組才出現(xiàn)比較明確的LV病毒顆粒峰；TFF處理后，回流液樣品的LV病毒顆粒峰更加尖銳，表明病毒顆粒分散度更好、穩(wěn)定性更高?；亓饕旱腘...

在干細(xì)胞醫(yī)治領(lǐng)域， 某些疾病靠單純的細(xì)胞替代并不能取得滿意效果。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒將外源目的基因整合到干細(xì)胞基因組，對(duì)基因功能缺失的遺傳病具有良好療效，但也存在一定致瘤風(fēng)險(xiǎn)。相比之下，CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能夠精確實(shí)現(xiàn)基因敲入、敲除及堿基修復(fù)。...

倫敦大學(xué)學(xué)院（UCL）的工藝開發(fā)團(tuán)隊(duì)，在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒（Lentivirus，LV）生產(chǎn)過程中，比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時(shí)間、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶...

大規(guī)模生產(chǎn)階段，AAV/LV載體生產(chǎn)流程跟抗體、疫苗類藥物的生產(chǎn)類似，主要包含上游培養(yǎng)、下游純化及制劑部分。上游培養(yǎng)分為質(zhì)粒開發(fā)、細(xì)胞擴(kuò)增、三質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染及病毒載體生產(chǎn)等步驟。下游純化分為細(xì)胞裂解釋放AAV病毒顆粒（可以通過去污劑、機(jī)械作用、高滲或凍融操作等）o...