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一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。為了測量吸光值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二極管。光度計的采購行情,貴不貴?西藏光譜儀光度計推薦
分光光度計是用不連續(xù)的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同,對不同波長光線的吸收能力也不同,因此,每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長的混合光中,將每一種單色光分離出來,并測量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計。分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見光區(qū),分光光度法則可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。分光光度法則要求近于真正單色光,其光譜帶寬比較大不超過3-5nm,在紫外區(qū)可到1nm以下,來自棱鏡或光柵,具有較高的精度。湖北光譜儀光度計操作光度計的應(yīng)用范圍十分廣闊。
紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計進(jìn)行定量時基于朗伯比爾定律,測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面,利用熒光分光光度計時,使用熒光強(qiáng)度。在低濃度時,熒光強(qiáng)度與濃度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測定結(jié)果,對兩個機(jī)種的定量、檢測下限值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度進(jìn)行了比較,下面將進(jìn)行介紹。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,調(diào)配~5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
光度計的原理光度計的原理基于光的電磁性質(zhì),通過測量光的強(qiáng)度來獲得光的亮度信息。光度計通常由光源、光學(xué)系統(tǒng)、探測器和信號處理器等組成。光源是產(chǎn)生光的裝置,可以是白熾燈、激光器、LED等。光源的選擇取決于測量的需求,例如需要測量特定波長的光線,則需要選擇相應(yīng)波長的光源。光學(xué)系統(tǒng)用于收集和聚焦光線,通常包括透鏡、反射鏡等光學(xué)元件。光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計和性能直接影響到光度計的測量精度和靈敏度。探測器是用于測量光的強(qiáng)度的裝置,常見的探測器有光電二極管(Photodiode)、光電倍增管(PhotomultiplierTube)等。探測器將光轉(zhuǎn)化為電信號,并輸出給信號處理器進(jìn)行處理。信號處理器對探測器輸出的電信號進(jìn)行放大、濾波、數(shù)字化等處理,得到光的強(qiáng)度信息。信號處理器的性能決定了光度計的測量精度和速度。光度計可以用于測量光源的溫度和能量。
紫外可見分光光度計有著較長的歷史,其主要理論框架早已建立,制作技術(shù)相對成熟。目前,紫外可見分光光度計在追求準(zhǔn)確、快速、可靠的同時,小型化、智能化、在線化、網(wǎng)絡(luò)化成為了現(xiàn)代紫外可見分光光度計新的增長點(diǎn)。紫外可見分光光度計的發(fā)展歷史分光光度法始于牛頓。早在1665年牛頓做了一個實(shí)驗(yàn):他讓太陽光透過暗室窗上的小圓孔,在室內(nèi)形成很細(xì)的太陽光束,該光束經(jīng)棱鏡色散后,在墻壁上呈現(xiàn)紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫的色帶。這色帶就稱為“光譜”。1815年夫瑯和費(fèi)仔細(xì)觀察了太陽光譜,發(fā)現(xiàn)太陽光譜中有600多條暗線,并且對主要的8條暗線標(biāo)以A、B、C、D…H的符號。這就是人們Z早知道的吸收光譜線,被稱為“夫瑯和費(fèi)線”。但當(dāng)時對這些線還不能作出正確的解釋。1859年本生和基爾霍夫發(fā)現(xiàn)由食鹽發(fā)出的黃色譜線的波長和“夫瑯和費(fèi)線”中的D線波長完全一致,才知一種物質(zhì)所發(fā)射的光波長(或頻率),與它所能吸收的波長(或頻率)是一致的。1862年密勒應(yīng)用石英攝譜儀測定了一百多種物質(zhì)的紫外吸收光譜。他把光譜圖表從可見區(qū)擴(kuò)展到了紫外區(qū),并指出:吸收光譜不只與組成物質(zhì)的基團(tuán)質(zhì)有關(guān)。接著,哈托萊和貝利等人,又研究了各種溶液對不同波段的截止波長。在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中,光度計常用于研究生物組織的活力和功能。西藏光譜儀光度計推薦
分光光度計可以用于研究物質(zhì)的熒光和磷光等光學(xué)特性。西藏光譜儀光度計推薦
兩束光合為一束。并交替通過入射狹縫進(jìn)入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過出射狹縫之后,被濾光片濾除高級次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號,經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見分光光度計二、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的概述不同:1、紫外分光光度計的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對稱的兩束,一束為樣品光通過樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過樣品室進(jìn)入光度計后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號。三、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。西藏光譜儀光度計推薦